产品货号:
GL1883
中文名称:
脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊微板法)
英文名称:
产品规格:
100T
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1~3天
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脑脊液总蛋白检测试剂盒(比浊微板法)可用于人或动物脑脊液样本中的总蛋白含量测定,但易受表面活性剂影响。
脑脊液中蛋白质与磺基水杨酸等作用,形成沉淀,用比浊法测定其浊度,与相同处理的标准液比较,求出样本中蛋白质的含量。
脑脊液(Cerebro-Spinal Fluid,CSF)是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内的无色透明液体,由脑室中的脉络丛产生,与血浆和淋巴液的性质相似,正常成年人的脑脊液约100~150mL,弱碱性,不含红细胞;正常脑脊液具有一定的化学成分和压力,对维持颅压的相对稳定有重要作用,当中枢神经系统受损时,脑脊液的检测成为重要的辅助诊断手段。总蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成,对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定,一般要基于如下两个假设:一是所有蛋白质分子由纯多肽组成,含氮量的质量百分比为16%;二是体液中含有数百个蛋白质分子,每个分子对测定反应都具有非常相似的特性,目前常用的检测总蛋白的方法有:双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
组分 | 规格 | 保存 |
蛋白标准 | 20mg | RT |
蛋白标准配制液 | 5mL | |
比浊显色液 | 20mL | 4℃避光 |
保存:2~8℃,避光,有效期6个月。
离心管、小试管、酶标仪、96孔板
- 蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。
- 比浊显色液放置时间长会产生微细沉淀,如不能完全复溶,应弃去。
- 加入显色液10min内浊度进行性增加,10min时达到顶点,如遇絮状物产生,应颠倒混匀后再测量。
- 如果脑脊液中所含蛋白浓度过高,应稀释后再进行检测,否则影响结果。
- 如果没有酶标仪,也可以使用分光光度计测定,使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
- 常规使用时可绘制标准曲线进行样品的测定。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 本试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
- 取1mL蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中,充分溶解后配制成20mg/mL蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存,取适量20mg/mL的蛋白标准溶液用蛋白标准配制液或稀释液继续进行稀释至0.5mg/mL。
- 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中,例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白标准溶解于蔗糖中,一般也可以用0.9% NaCl或PBS作为稀释液。
- TP加样:按照下表设置系列孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡;如果样品浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行孔。
加入物(μL) 空白孔 标准孔 测定孔 蛋白标准配制液 25 - - 蛋白标准溶液(0.5mg/mL) - 25 - 待检样品(脑脊液) - - 25 比浊显色液 200 200 200 - TP测定:混匀,室温孵育10min,酶标仪测定530nm波长处的吸光度,以空白孔调零,读取标准孔和测定孔的吸光度(即为A 标准和A 测定)。
脑脊液总蛋白(mg/L)=A 测定/A 标准×500(mg/L)
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